IPTG CAS:367-93-1 Harga Pengeluar
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) ialah analog sintetik laktosa yang biasa digunakan dalam penyelidikan biologi molekul dan aplikasi bioteknologi.IPTG digunakan terutamanya untuk mendorong ekspresi gen dalam sistem bakteria, di mana ia berfungsi sebagai pencetus molekul untuk memulakan transkripsi gen sasaran.
Apabila ditambah kepada medium pertumbuhan, IPTG diambil oleh bakteria dan boleh mengikat protein penindas lac, menghalangnya daripada menyekat aktiviti operon lac.Lac operon ialah sekumpulan gen yang terlibat dalam metabolisme laktosa, dan apabila protein penindas dikeluarkan, gen tersebut dinyatakan.
IPTG sering digunakan bersama dengan promoter mutan lacUV5, yang merupakan versi aktif dari promoter lac.Dengan menggabungkan induksi IPTG dengan promoter mutan ini, penyelidik boleh mencapai tahap ekspresi gen yang tinggi.Ini membolehkan pengeluaran protein dalam kuantiti yang banyak untuk penulenan atau aplikasi hiliran lain.
Sebagai tambahan kepada ekspresi gen, IPTG juga kerap digunakan dalam ujian saringan biru/putih.Dalam teknik ini, gen lacZ biasanya digabungkan dengan gen yang diminati, dan bakteria yang berjaya mengekspresikan gen gabungan ini akan menghasilkan enzim β-galactosidase yang aktif.Apabila IPTG ditambah bersama substrat kromogenik seperti X-gal, bakteria yang menyatakan gen pelakuran bertukar menjadi biru disebabkan oleh aktiviti β-galactosidase.Ini membolehkan pengenalpastian dan pemilihan strain rekombinan yang telah berjaya menyepadukan gen yang diminati.
Induksi ekspresi gen: IPTG biasanya digunakan untuk mendorong ekspresi gen sasaran dalam sistem bakteria.Ia meniru laktosa induksi semula jadi dan mengikat kepada protein penindas lac, menghalangnya daripada menyekat operon lac.Ini membolehkan transkripsi dan ekspresi gen yang dikehendaki.
Ekspresi dan penulenan protein: Induksi IPTG sering digunakan untuk menghasilkan sejumlah besar protein rekombinan untuk pelbagai tujuan, seperti kajian biokimia, pengeluaran terapeutik atau analisis struktur.Dengan menggunakan vektor ekspresi yang sesuai dan induksi IPTG, penyelidik boleh mencapai tahap pengeluaran protein sasaran yang tinggi dalam perumah bakteria.
Pemeriksaan biru/putih: IPTG kerap digunakan dalam kombinasi dengan gen lacZ dan substrat kromogenik, seperti X-gal, untuk ujian saringan biru/putih.Gen lacZ biasanya bergabung dengan gen yang diminati, dan bakteria yang berjaya mengekspresikan gen gabungan ini akan menghasilkan enzim β-galactosidase yang aktif.Apabila IPTG dan substrat kromogenik ditambah, strain rekombinan yang menyatakan gen gabungan bertukar menjadi biru, membolehkan pengecaman dan pemilihan mudah.
Kajian peraturan gen: Induksi IPTG biasanya digunakan dalam penyelidikan untuk mengkaji peraturan gen dan operon, terutamanya operon lac.Dengan memanipulasi kepekatan IPTG dan memantau ekspresi komponen lac operon, penyelidik boleh menyiasat mekanisme pengawalan gen dan peranan pelbagai faktor atau mutasi.
Sistem ekspresi gen: IPTG ialah komponen penting dalam beberapa sistem ekspresi gen, seperti sistem berasaskan promoter T7.Dalam sistem ini, promoter lac sering digunakan untuk memacu ekspresi T7 RNA polymerase, yang seterusnya, mentranskripsikan gen sasaran di bawah kawalan jujukan promoter T7.IPTG digunakan untuk mendorong ekspresi polimerase RNA T7, yang membawa kepada pengaktifan ekspresi gen sasaran.
| Komposisi | C9H18O5S |
| Ujian | 99% |
| Penampilan | Serbuk putih |
| CAS No. | 367-93-1 |
| Pembungkusan | Kecil dan pukal |
| Jangka hayat | 2 tahun |
| Penyimpanan | Simpan di kawasan sejuk dan kering |
| Pensijilan | ISO. |
