4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Kesan: ONPG ialah substrat yang digunakan khusus untuk mengesan kehadiran dan aktiviti enzim β-galactosidase.Apabila enzim β-galactosidase hadir dan aktif, ia membelah ONPG kepada dua produk: o-nitrophenol dan derivatif galaktosa.Pembebasan o-nitrophenol menghasilkan perubahan warna kuning, yang boleh diukur menggunakan spektrofotometer.

Permohonan: ONPG mempunyai beberapa aplikasi dalam biologi molekul dan penyelidikan biokimia:

Penentuan aktiviti β-galactosidase: ONPG biasanya digunakan untuk mengukur dan mengukur aktiviti enzim β-galactosidase.Kadar pembentukan o-nitrophenol, yang berkadar terus dengan aktiviti enzim, boleh diukur secara spektrofotometri.

Ekspresi dan peraturan gen: ONPG sering digunakan dalam eksperimen yang berkaitan dengan ekspresi gen dan kajian peraturan.Ia kerap digunakan dalam ujian protein gabungan, seperti sistem gabungan lacZ yang biasa digunakan, untuk mengkaji ekspresi gen di bawah kawalan promoter tertentu.Aktiviti beta-galactosidase yang diukur menggunakan ONPG memberikan pandangan tentang tahap ekspresi gen.

Pemeriksaan untuk aktiviti β-galactosidase: ONPG boleh digunakan sebagai kaedah pemeriksaan kolorimetrik dalam teknologi DNA rekombinan untuk mengenal pasti kehadiran dan kefungsian gen LacZ, yang mengekodkan β-galactosidase.Kaedah saringan ini membantu dalam mengenal pasti klon yang mengandungi gen yang diminati.

Kajian kinetik enzim: ONPG juga berguna dalam mengkaji kinetik enzim β-galactosidase.Dengan mengukur kadar tindak balas enzim-substrat pada kepekatan substrat yang berbeza, adalah mungkin untuk menentukan parameter kinetik seperti pemalar Michaelis-Menten (Km) dan kadar tindak balas maksimum (Vmax).