4-Nitrofenil beta-D-galaktopiranosida CAS:200422-18-0

Kesan: ONPG ialah substrat yang digunakan khusus untuk mengesan kehadiran dan aktiviti enzim β-galaktosidase. Apabila enzim β-galaktosidase hadir dan aktif, ia akan membelah ONPG kepada dua produk: o-nitrofenol dan terbitan galaktosa. Pembebasan o-nitrofenol menghasilkan perubahan warna kuning, yang boleh diukur menggunakan spektrofotometer.

Aplikasi: ONPG mempunyai beberapa aplikasi dalam penyelidikan biologi molekul dan biokimia:

Penentuan aktiviti β-galaktosidase: ONPG biasanya digunakan untuk mengukur dan mengukur aktiviti enzim β-galaktosidase. Kadar pembentukan o-nitrofenol, yang berkadar terus dengan aktiviti enzim, boleh diukur secara spektrofotometri.

Ekspresi dan pengawalaturan gen: ONPG sering digunakan dalam eksperimen yang berkaitan dengan kajian ekspresi dan pengawalaturan gen. Ia sering digunakan dalam ujian protein gabungan, seperti sistem gabungan lacZ yang biasa digunakan, untuk mengkaji ekspresi gen di bawah kawalan promoter tertentu. Aktiviti beta-galaktosidase yang diukur menggunakan ONPG memberikan pandangan tentang tahap ekspresi gen.

Saringan untuk aktiviti β-galaktosidase: ONPG boleh digunakan sebagai kaedah saringan kolorimetrik dalam teknologi DNA rekombinan untuk mengenal pasti kehadiran dan fungsi gen LacZ, yang mengekod β-galaktosidase. Kaedah saringan ini membantu dalam mengenal pasti klon yang mengandungi gen yang diminati.

Kajian kinetik enzim: ONPG juga berguna dalam mengkaji kinetik enzim β-galaktosidase. Dengan mengukur kadar tindak balas enzim-substrat pada kepekatan substrat yang berbeza, adalah mungkin untuk menentukan parameter kinetik seperti pemalar Michaelis-Menten (Km) dan kadar tindak balas maksimum (Vmax).