Fenilgalaktosida CAS:2818-58-8

Kesan terhadap aktiviti enzim: Fenilgalaktosida biasanya digunakan untuk mengukur aktiviti enzim β-galaktosidase. Apabila fenilgalaktosida dihidrolisiskan oleh β-galaktosidase, ia melepaskan p-nitrofenol. Pengumpulan p-nitrofenol boleh diukur secara kuantitatif, memberikan gambaran tentang aktiviti β-galaktosidase. Kesan ini dimanfaatkan dalam aplikasi seperti ujian enzim dan sistem saringan.

Analisis ekspresi gen: Fenilgalaktosida sering digunakan sebagai substrat dalam eksperimen biologi molekul untuk mengkaji ekspresi gen. Gen lacZ, yang mengekod β-galaktosidase, biasanya digabungkan dengan urutan pengawalseliaan gen lain yang diminati. Ekspresi gen lacZ dan hidrolisis fenilgalaktosida oleh β-galaktosidase dapat menunjukkan corak ekspresi dan tahap gen sasaran yang sedang dikaji.

Sistem saringan: Fenilgalaktosida merupakan komponen penting dalam sistem saringan yang menggunakan aktiviti β-galaktosidase. Satu contoh yang diketahui umum ialah kaedah saringan biru-putih, yang digunakan untuk mengenal pasti sel rekombinan atau sel yang diubah suai dalam eksperimen biologi molekul. Koloni yang telah berjaya mengambil DNA rekombinan atau menjalani penggabungan semula genetik akan mengekspresikan β-galaktosidase, yang membawa kepada hidrolisis fenilgalaktosida dan pembentukan warna biru.

Penulenan protein: Dalam beberapa kes, fenilaktosida boleh digunakan sebagai ligan untuk kromatografi afiniti bagi menulenkan protein yang secara khusus terikat atau diaktifkan oleh β-galaktosidase. Protein yang diminati mungkin mempunyai tag afiniti atau tag gabungan yang mengandungi domain pengikatan β-galaktosidase. Dengan memasukkan campuran protein melalui lajur dengan fenilaktosida yang terimobilisasi, protein yang dikehendaki boleh dikekalkan secara selektif dan seterusnya dielusi.